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細(xì)胞轉(zhuǎn)染
當(dāng)前位置:首頁 > 科研全覆蓋檢測 > 細(xì)胞生物學(xué)檢測 > 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 > 細(xì)胞轉(zhuǎn)染

 

Cell transfection

細(xì)胞誘導(dǎo)

轉(zhuǎn)染是使用非病毒感染的手段人工引入核酸(DNA或RNA)進(jìn)入細(xì)胞的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白,或特異性增強(qiáng)或抑制砸昏然細(xì)胞中的基因表達(dá)。

轉(zhuǎn)染的類型

瞬轉(zhuǎn):

因?yàn)閷?dǎo)入的核酸沒有整合到宿主細(xì)胞基因組,因此它只會(huì)短暫地存在于宿主細(xì)胞中,不會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而進(jìn)入到子代細(xì)胞中。然而,導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)的高拷貝數(shù)導(dǎo)致其在細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)表達(dá)水平較高。

穩(wěn)轉(zhuǎn):

外源DNA整合到細(xì)胞基因組中或作為哦附加體質(zhì)粒保存在細(xì)胞中。與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染允許外源DNA在轉(zhuǎn)染的細(xì)胞及其后代中的長期維持。然而通常是將單拷貝或幾個(gè)拷貝的外源DNA整合到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞的基因組中,因此,其表達(dá)水平一般低于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的表達(dá)水平。

瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)的比較:

瞬轉(zhuǎn) 穩(wěn)賺
導(dǎo)入的DNA沒有整合到基因組中,而是保留在細(xì)胞核上 導(dǎo)入的DNA整合到基因組中
導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)不傳遞到子代;遺傳改變只是暫時(shí)的 導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)能夠代代相傳;遺傳改變時(shí)永久的
不需要選擇性遺傳 需要選擇性篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞
DNA載體和RNA都可用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染 只有DNA載體可用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染;RNA本身不能穩(wěn)定地導(dǎo)入細(xì)胞中
導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)的高拷貝數(shù)導(dǎo)致高水平的蛋白表達(dá) 單拷貝數(shù)或低拷貝數(shù)的穩(wěn)定整合的DNA導(dǎo)致較低水平的蛋白質(zhì)表達(dá)
通常在轉(zhuǎn)染后24-96小室內(nèi)收獲細(xì)胞 需要2-3周的時(shí)間篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞克隆
通常不適合使用具有誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的載體的研究 適用于使用帶有誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的載體的研究

服務(wù)價(jià)格

商品信息 貨號(hào) 單價(jià) 備注
誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染mimic/
inhibitor轉(zhuǎn)染
LLJ021 2000元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑
質(zhì)粒轉(zhuǎn)染 LLJ013 2500元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑
轉(zhuǎn)染(siRNA/shRNA) LLJ014 2000元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑,設(shè)三保一或者客戶提供已驗(yàn)證的序列
轉(zhuǎn)染(miRNA) LLJ015 2000元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑
慢/腺病毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染 LLJ016 3000元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑
慢病毒細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 LLJ017 6000元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑。一株細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)通常會(huì)構(gòu)建2株(對(duì)照株NC,轉(zhuǎn)染株)
細(xì)胞沉默/敲低效
率驗(yàn)證樣本提供
LLJ018 840元/指標(biāo) 細(xì)胞沉默需要"設(shè)三保一"即設(shè)計(jì)3條序列轉(zhuǎn)染細(xì)胞,PCR篩選最佳的一條序列進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),涉及沉默(或者敲低)的,需要額外報(bào)12例PCR提樣(對(duì)照組/序列1組/序列2組/序列3組,每組3重復(fù))+1個(gè)引物+檢測。注意:客戶提供確定序列的,不需要此項(xiàng)
細(xì)胞過表達(dá)效率
驗(yàn)證樣本提取
LLJ019 420元/指標(biāo) 過表達(dá)樣本分組過表達(dá)對(duì)照組,過表達(dá)組,魅族3重復(fù),共計(jì)6例,進(jìn)行PCR檢測

實(shí)驗(yàn)掠影

檢測平臺(tái)
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細(xì)胞轉(zhuǎn)染

 

Cell transfection

細(xì)胞誘導(dǎo)

轉(zhuǎn)染是使用非病毒感染的手段人工引入核酸(DNA或RNA)進(jìn)入細(xì)胞的過程。轉(zhuǎn)染的目的是產(chǎn)生重組蛋白,或特異性增強(qiáng)或抑制砸昏然細(xì)胞中的基因表達(dá)。

轉(zhuǎn)染的類型

瞬轉(zhuǎn):

因?yàn)閷?dǎo)入的核酸沒有整合到宿主細(xì)胞基因組,因此它只會(huì)短暫地存在于宿主細(xì)胞中,不會(huì)隨著細(xì)胞的分裂而進(jìn)入到子代細(xì)胞中。然而,導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)的高拷貝數(shù)導(dǎo)致其在細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)表達(dá)水平較高。

穩(wěn)轉(zhuǎn):

外源DNA整合到細(xì)胞基因組中或作為哦附加體質(zhì)粒保存在細(xì)胞中。與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染允許外源DNA在轉(zhuǎn)染的細(xì)胞及其后代中的長期維持。然而通常是將單拷貝或幾個(gè)拷貝的外源DNA整合到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞的基因組中,因此,其表達(dá)水平一般低于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的表達(dá)水平。

瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)的比較:

瞬轉(zhuǎn) 穩(wěn)賺
導(dǎo)入的DNA沒有整合到基因組中,而是保留在細(xì)胞核上 導(dǎo)入的DNA整合到基因組中
導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)不傳遞到子代;遺傳改變只是暫時(shí)的 導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)能夠代代相傳;遺傳改變時(shí)永久的
不需要選擇性遺傳 需要選擇性篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞
DNA載體和RNA都可用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染 只有DNA載體可用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染;RNA本身不能穩(wěn)定地導(dǎo)入細(xì)胞中
導(dǎo)入的遺傳物質(zhì)的高拷貝數(shù)導(dǎo)致高水平的蛋白表達(dá) 單拷貝數(shù)或低拷貝數(shù)的穩(wěn)定整合的DNA導(dǎo)致較低水平的蛋白質(zhì)表達(dá)
通常在轉(zhuǎn)染后24-96小室內(nèi)收獲細(xì)胞 需要2-3周的時(shí)間篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞克隆
通常不適合使用具有誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的載體的研究 適用于使用帶有誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的載體的研究

服務(wù)價(jià)格

商品信息 貨號(hào) 單價(jià) 備注
誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染mimic/
inhibitor轉(zhuǎn)染
LLJ021 2000元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑
質(zhì)粒轉(zhuǎn)染 LLJ013 2500元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑
轉(zhuǎn)染(siRNA/shRNA) LLJ014 2000元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑,設(shè)三保一或者客戶提供已驗(yàn)證的序列
轉(zhuǎn)染(miRNA) LLJ015 2000元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑
慢/腺病毒細(xì)胞轉(zhuǎn)染 LLJ016 3000元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑
慢病毒細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 LLJ017 6000元/指標(biāo) 不含細(xì)胞株、轉(zhuǎn)染試劑。一株細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)通常會(huì)構(gòu)建2株(對(duì)照株NC,轉(zhuǎn)染株)
細(xì)胞沉默/敲低效
率驗(yàn)證樣本提供
LLJ018 840元/指標(biāo) 細(xì)胞沉默需要"設(shè)三保一"即設(shè)計(jì)3條序列轉(zhuǎn)染細(xì)胞,PCR篩選最佳的一條序列進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),涉及沉默(或者敲低)的,需要額外報(bào)12例PCR提樣(對(duì)照組/序列1組/序列2組/序列3組,每組3重復(fù))+1個(gè)引物+檢測。注意:客戶提供確定序列的,不需要此項(xiàng)
細(xì)胞過表達(dá)效率
驗(yàn)證樣本提取
LLJ019 420元/指標(biāo) 過表達(dá)樣本分組過表達(dá)對(duì)照組,過表達(dá)組,魅族3重復(fù),共計(jì)6例,進(jìn)行PCR檢測

實(shí)驗(yàn)掠影