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甲基化
當(dāng)前位置:首頁 > 科研全覆蓋檢測 > 分子生物學(xué)檢測 > BSP甲基化 > 甲基化

 

甲基化檢測

DNA甲基化通常抑制基因表達(dá),去甲基化則誘導(dǎo)了基因的重新活化和表達(dá)。這種DNA修飾方式在不改變基因序列前提下實(shí)現(xiàn)對基因表達(dá)的調(diào)控。

檢測原理

BSP甲基化測序(Bisulfite Genomic SequencingPCR)的原理通過對基因組DNA進(jìn)行重亞硫酸鹽處理,非甲基化的胞嘧啶被脫氨基而轉(zhuǎn)變成尿嘧啶,在隨后的PCR反應(yīng)中尿嘧啶轉(zhuǎn)變成胸腺嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不能被脫氨基,在反應(yīng)完成時(shí)被保留,我們將擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物進(jìn)行TA克隆測序,可以分析甲基化發(fā)生的具體情況。該方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性高,是甲基化檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。

常規(guī)檢測流程

引物
設(shè)計(jì)
DND
提取
亞硫酸氫鈉修飾
基因組DNA
修飾后DNA
純化回收
修飾后DNA
用于PCR
測序
數(shù)據(jù)
分析
完成

BSP甲基化結(jié)果分析

檢測平臺(tái)
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甲基化

 

甲基化檢測

DNA甲基化通常抑制基因表達(dá),去甲基化則誘導(dǎo)了基因的重新活化和表達(dá)。這種DNA修飾方式在不改變基因序列前提下實(shí)現(xiàn)對基因表達(dá)的調(diào)控。

檢測原理

BSP甲基化測序(Bisulfite Genomic SequencingPCR)的原理通過對基因組DNA進(jìn)行重亞硫酸鹽處理,非甲基化的胞嘧啶被脫氨基而轉(zhuǎn)變成尿嘧啶,在隨后的PCR反應(yīng)中尿嘧啶轉(zhuǎn)變成胸腺嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不能被脫氨基,在反應(yīng)完成時(shí)被保留,我們將擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物進(jìn)行TA克隆測序,可以分析甲基化發(fā)生的具體情況。該方法實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性高,是甲基化檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。

常規(guī)檢測流程

引物
設(shè)計(jì)
DND
提取
亞硫酸氫鈉修飾
基因組DNA
修飾后DNA
純化回收
修飾后DNA
用于PCR
測序
數(shù)據(jù)
分析
完成

BSP甲基化結(jié)果分析